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    ELISA的原理和類型

    發(fā)布時(shí)間: 2010-07-19  點(diǎn)擊次數(shù): 1891次

    ELISA的原理

    ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度

    ELISA的類型

    ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑:(1)固相的抗原或抗體,即"免疫吸附劑"immunosorbent);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為“酶聯(lián)物”、“結(jié)合物”(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。用于臨床檢驗(yàn)的ELISA主要有以下幾種類型:

     

    雙抗體夾心法測(cè)抗原

    雙抗原夾心法測(cè)抗體

     間接法測(cè)抗體我公司分裝TORCH及傳染病試劑盒大多采用本法

    競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體

    競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原

     

    捕獲包被法測(cè)抗體(經(jīng)典方法)

     ABS-ELISA

     

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